Le Cycle Replicatif Du Rice Hoja Blanca Virus Un Modele Pour Les Virus Ambisens

LE CYCLE REPLICATIF DU RICE HOJA BLANCA VIRUS UN MODELE POUR LES VIRUS AMBISENS

LE RICE HOJA BLANCA VIRUS (RHBV) APPARTIENT AUX TENUIVIRUS, PETIT GROUPE DE VIRUS DE PLANTE A ARN AMBISENS APPARENTE AUX VIRUS DE LA FAMILLE DES BUNYAVIRIDAE. AU COURS DE CETTE THESE, NOUS AVONS MIS AU POINT DEUX SYSTEMES D'ETUDES PERMETTANT D'EXPLORER IN VITRO ET IN VIVO LES MECANISMES DE LA TRANSCRIPTION, DE LA REPLICATION ET DE LA TRADUCTION DU RHBV. PAR AILLEURS, AFIN DE MIEUX COMPRENDRE LES MECANISMES DU CYCLE REPLICATIF DES VIRUS A ARN AMBISENS, UN AUTRE VIRUS A ARN AMBISENS DE PLANTE, LE TOMATO SPOTTED WILT TOSPOVIRUS (TSWV ; FAMILLE DES BUNYAVIRIDAE) A ETE ETUDIE IN VITRO EN PARALLELE AVEC LE RHBV. IL APPARAIT QUE LA POLYMERASE DE CES DEUX VIRUS REPLIQUE PREFERENTIELLEMENT LES ARN GENOMIQUES DE POLARITE VIRALE. TOUTEFOIS, LE TSWV AURAIT BESOIN DE COUPLER SA TRANSCRIPTION AVEC LA TRADUCTION POUR SYNTHETISER SES ARNM, ALORS QUE LA TRANSCRIPTION DU RHBV EST INDEPENDANTE DE LA TRADUCTION. CES RESULTATS INDIQUENT QUE LES VIRUS A ARN AMBISENS POURRAIENT ETRE DEPARTAGES EN DEUX CATEGORIES SELON QUE LA TRANSCRIPTION DE LEURS ARNM DEPENDE OU NON D'UN COUPLAGE AVEC LA TRADUCTION. POUR LE RHBV, BIEN QUE LE COUPLAGE DE LA TRANSCRIPTION A LA TRADUCTION NE SEMBLE PAS INDISPENSABLE, IL PERMET D'AUGMENTER LA SYNTHESE PROTEIQUE DES ARNM TRANSCRITS DE NOVO, SUGGERANT QUE CE MECANISME POURRAIT ETRE UN MOYEN DE REGULATION DE L'EXPRESSION DES PROTEINES VIRALES.

EXPLORATION DE LA BIOLOGIE MOLECULAIRE DU RICE HOJA BLANCA VIRUS

DES ETUDES ONT ETE ENTREPRISES POUR CARACTERISER LE GENOME DU TENUIVIRUS RICE HOJA BLANCA VIRUS (RHBV). LE RHBV EST RESPONSABLE DE LA MALADIE HOJA BLANCA DU RIZ, MALADIE PRESENTE DANS PRESQUE TOUS LES PAYS PRODUCTEURS DE RIZ D'AMERIQUE TROPICALE. LE VECTEUR DU RHBV EST L'INSECTE TAGOSODES ORIZICOLUS MUIR DANS LEQUEL LE VIRUS SE MULTIPLIE EGALEMENT. LE GENOME DU RHBV EST COMPOSE DE QUATRE ARN SIMPLE-BRIN (DESIGNES ARN1 A ARN4 DANS L'ORDRE DECROISSANT DE LEUR TAILLE). LES ANALYSES D'HYBRIDATION AVEC DES SONDES D'ARN DE POLARITE VIRALE (V) OU VIRALE COMPLEMENTAIRE (VC) ONT MONTRE QUE DES QUANTITES DIFFERENTES D'ARN4 DES DEUX POLARITES AINSI QU'UN ARN4 SUBGENOMIQUE SONT ENCAPSIDES. DES ETUDES DE TRADUCTION IN VITRO ET D'IMMUNOPRECIPITATION ONT MONTRE QUE LES ARN TOTAUX DU RHBV DIRIGENT LA SYNTHESE DE DEUX PROTEINES DE 23K (K=KILODALTON) ET DE 21K. L'ARN3 DIRIGE LA SYNTHESE DE LA PROTEINE DE 23K APPELEE NS3, ET L'ARN4 LA SYNTHESE DE LA PROTEINE DE 21K APPELEE NS4. LA PROTEINE NS4 CORRESPOND A LA PROTEINE NON STRUCTURALE QUI S'ACCUMULE DANS LES PLANTES INFECTEES (PROTEINE D'INCLUSION). LA PROTEINE NC N'EST TRADUITE IN VITRO NI PAR LES ARN TOTAUX NI PAR L'UN DES ARN ISOLES. LA SEQUENCE COMPLETE DE L'ARN4 ET PARTIELLE DE L'ARN3 DU RHBV CONFIRME L'UTILISATION PAR CES DEUX ARN DE LA STRATEGIE D'EXPRESSION AMBISENS. L'ARN4V CONTIENT LA PHASE OUVERTE DE LECTURE (ORF) DE LA PROTEINE NS4, ET L'ARN4VC CONTIENT L'ORF D'UNE PROTEINE DE 32,5K. L'ARN3V CONTIENT L'ORF DE LA PROTEINE NS3, ET L'ARN3VC CONTIENT L'ORF DE LA PROTEINE NC. LA STRATEGIE AMBISENS EST UTILISEE PAR LES ARENAVIRIDAE, DES VIRUS APPARTENANT A LA FAMILLE DES BUNYAVIRIDAE, ET PAR LES TENUIVIRUS. LES ARN MESSAGERS DU RHBV SONT SYNTHETISES PAR CAP-SNATCHING, MECANISME DECRIT POUR LE VIRUS DE LA GRIPPE, POUR LES ARENAVIRIDAE, ET POUR CERTAINS BUNYAVIRIDAE

Molecular Studies on Rice Hoja Blanca Virus (RHBV).